上海秉越電子儀器有限公（gōng）司

培養基的滅菌及使用

1.每次配置時，要注意其生產（chǎn）日期是否在保質期內，查看其開瓶日期及瓶口密封性，保證其（qí）未變（biàn）質，並且未吸潮。
2.培養基配置時，稱量要準確，包括（kuò）鹽水的分裝要準確。
3.一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培（péi）養基不能長（zhǎng）時間放置，更不可隔夜。
4.滅菌時要保證（zhèng）恒溫、恒壓，同時要（yào）保證有（yǒu）效滅菌（jun1）時間。
5.滅菌過的培養基要冰（bīng）箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循（xún）“先入先出（chū）”原則，先配製的要先使用。
6.在使（shǐ）用時，要根據當班次的使用量，用水浴（yù）鍋先將培養基溶化為液態，然後（hòu）及時調低水域溫度（先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上）待用，千萬不可長時間使培養基處於高溫狀態。
7.做（zuò）產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右（yòu），不可（kě）過（guò）燙，避免將菌燙死；也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便於觀察結果。
8.每瓶培養基均要做空白。
9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞（sāi），增（zēng）大（dà）培養基的（de）汙染幾率，出現誤差結（jié）果。
10.培養基剩餘過少時，可先將其傾倒成空白用板。

做樣環境的維持

一（yī）、大（dà）環境（房間）
1.做樣時，窗戶和空調要關閉，或用酒精（jīng）對房間進行噴霧消毒，避免房間內空氣流通影響超淨台內部環境（jìng）（在（zài）有通排風係統的（de）恒溫恒濕無菌（jun1）間進行操作（zuò））。
2.如果在原來的原料微生物檢測室進行做樣，要定期開（kāi）啟紫外燈，對（duì）房間進行殺菌。
二、小環境（jìng）（超淨台）
1.定期清潔初效（xiào）過濾器，要及時更換。
2.做樣前，將超（chāo）淨台內部進行清（qīng）潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，並提前半小時將超淨台紫外燈打開，對超淨台內部環（huán）境進行殺菌（jun1）。
3.關紫外燈，開風機，調整合適進（jìn）風量，風量不可過低。
4.每次做樣後，要對超淨台內部進行清理、清（qīng）潔，並用 75%酒精進行擦（cā）拭消毒。
5.紫外燈根據其使（shǐ）用壽命要及時更換。
6.做樣同時，要做上相應菌落檢測的環境（jìng）空白。
7.做樣區域的選擇：
①一般在距離超淨台外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作；
②要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行（háng）操作。

 工器（qì）具的（de）潔淨（jìng）度

1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌方式進行滅菌（jun1）。

2.做（zuò）樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用，不可與其它操作器具混用，使用（yòng）時，先用75%酒精消毒，再采用灼燒方式進行滅菌。

3.接種針（環（huán））采用灼燒方（fāng）式進行滅菌，但要注意做樣時要先將接種針（環）進（jìn）行冷卻。

樣品的采集及檢測

一（yī）、保證采樣器具的無菌性
1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌方式進行滅菌，保證（zhèng）恒溫、時間足夠（但不可時間過長，導致玻璃器皿易裂紋而報廢）。
2.取樣（yàng）筐：使用（yòng）前要用 75%酒精進行噴灑（sǎ）消毒
3.取樣勺（sháo）、濃奶（nǎi）取樣提子：要保證其清潔消毒（dú），清潔後用 75%酒精（jīng）進行擦拭消毒。
4.取樣（yàng）袋：可現用酒精進（jìn）行擦拭消毒，再（zài）在超淨台用紫外燈照射消（xiāo）毒，（包裝車（chē）間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）。
5.電子稱表麵用 75%酒精消毒。

二、人員操作
1.保證手部的清洗、消毒：取樣（yàng）前及做樣前都要先洗手再消毒。
2.取樣（yàng）要具有代表性（隨機樣、目（mù）的樣、綜合樣）且（qiě）要標示清楚。
3.取樣完畢，不可在車（chē）間逗留，要及（jí）時將樣品放入超（chāo）淨台，對（duì）其外表麵進行紫外（wài）燈照射消毒。
4.在要求的做樣區域進行操（cāo）作。
5.做樣前，要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消（xiāo）毒，再開口。
6.往（wǎng）鹽水瓶加樣品（pǐn）時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
7.樣品計量（liàng）要準確，稀釋（shì）倍數也要準確（1mL 吸管不（bú）允許（xǔ）將管口敲掉），進行 100 倍稀（xī）釋時，1mL 吸管（guǎn）要伸入鹽（yán）水中，不可（kě）以將樣品管壁流下去（qù），同時要避免將管底部捅破。
8.鹽水溫（wēn）度以 40℃左右為宜，不能過熱，將部分微生物燙死，也不能溫度太低，不能將奶粉溶解完全。
9.進行稀釋時（shí），要搖（yáo）勻，保證溶液的均一性。
10.傾倒平皿時（shí），要（yào）注意培養基瓶口（kǒu）不要接觸到平皿；傾倒的培養基要適（shì）量，不可以太少，在培養過程中幹掉，微生物亦（yì）死亡，以 15mL 左（zuǒ）右為宜（yí）。
11.做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽（yán）培養基培（péi）養管按需要量備好，放入超淨（jìng）台對外表麵進行紫外線滅菌。
12.接二步（bù）時，要注意先將接種針（環）進行冷卻，避免出現接不上菌落的情況發生，導致無法判斷（duàn）、確認。
13.做樣完畢，及時放入相應培養箱進行培養（yǎng），並清理清潔超淨台。