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首先17C一起草應該了解17C一起草的無菌室應該（gāi）處於什麽狀態，有什麽要求。一般情況下，17C一起草的無菌室達到空間潔淨度10000級就可以了，但操作（zuò）區域例如超（chāo）淨工作台、生物安全櫃裏需要達到潔淨度100級，也就是17C一起草常說的“整體萬級，局部（bù）百級”。萬級潔淨度對空間落菌的要求是：靜態檢測，自然沉降菌（jun1）≤3CFU/皿，百級潔（jié）淨度對空間（jiān）落菌的要求是（shì）：靜態（tài）檢測，自然沉降菌≤1CFU/皿。也就是（shì）說平時我（wǒ）們做的（de）空間驗證，隻要不超過這個標準，就是符合（hé）要求的，因此（cǐ）也不必太（tài）過擔憂。

那麽，怎樣能夠保證17C一起草的無菌室符合要求？當17C一起草的無菌室出現異常應該如何（hé）處理？

我（wǒ）們得（dé）先從無菌室的滅（miè）菌方式開始講。一（yī）般（bān）無菌室的滅菌方式分為：紫外線照射、臭氧滅菌、化學熏蒸這幾種（zhǒng）。這幾種滅菌方式各自有各自的特點，大家可以根據自己的實際（jì）情況來選擇合適的滅菌方式，遇到異常難以解決時，也可以（yǐ）考慮增加一（yī）種滅菌方式來解決。

紫外線照射（shè）：紫外線滅菌是利用適當波長的紫外線破壞微生物機體細胞中的DNA或RNA結構，造成生長性細胞死亡來達到滅（miè）菌效果，屬於一種物理（lǐ）方式的滅菌，也是17C一起草（men）微生物檢測無菌室最常用的滅菌方式。該方法操作簡單，使用方便，也比較（jiào）經濟，可以殺滅各種微生物，包括細菌、病毒、真（zhēn）菌、立克次體以及支原體等，因此在實驗室（shì）裏（lǐ），是最常見（jiàn）的滅菌方式。

但紫外線（xiàn）滅（miè）菌也有一定的缺點，紫外線隻能對直接（jiē）照射到的微（wēi）生物起到殺滅（miè）作用，因此隻能對空間中照射到的地方起作用，一些（xiē）照射不到的（de）死角或者物品的內部是無法達到效果的，因此使用（yòng）紫外線滅菌的無菌（jun1）室，也會輔助以一些化學試劑，例如潔爾滅、酒精等消毒劑對死角進行清理。使用紫外線滅（miè）菌，應當定期檢測紫外線的強度，若（ruò）是無（wú）法達到要求的強度，就應該考慮更換紫外燈。根據2002年國家衛生（shēng）部（bù）發布的《消毒技術規範》，紫外燈的要求（qiú）是紫外線（xiàn）強度不得低於70μW/cm²（紫外（wài）燈1m處），而空間內的紫外燈的布局（jú）也是有要求的，要求平均每m³不少於1.5W。也就是說，假如（rú）你無菌室是5m²，實驗（yàn）室高度是3米，那麽（me）你的空間體積就是（shì）15m³，你空間中（zhōng）使用的紫外燈的功率就不得（dé）低於22.5w。按照這個方式就可以算一（yī）下你的無菌室需要多（duō）少紫外燈了。當紫外線的強度達不到要求時，就（jiù）需要更換紫外燈了。

臭氧滅菌：臭氧（yǎng）是一種強氧化劑，滅菌過程屬生物（wù）化學氧化反應。

O₃滅菌（jun1）原理一般有以下三種：

1.臭氧（yǎng）通過氧化分解細菌內部葡萄糖（táng）所（suǒ）需的酶，使細菌滅活死亡。

2.直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細（xì）胞器和DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡（wáng）。

3.透過細胞膜組織，侵入細胞內，作（zuò）用於膜內的脂蛋白和內部的脂多糖（táng），改（gǎi）變細（xì）胞的通透性，導致細胞溶解死亡。

使用臭氧滅菌，殺菌徹底，無（wú）殘留，殺菌廣譜，可殺滅細菌繁（fán）殖體和芽孢、病毒、真菌（jun1）等（děng），並可破壞肉毒杆菌毒素。另外，O3對黴菌也（yě）有極強的殺滅作用。O3為氣體，能迅速彌漫到整個滅菌（jun1）空間，滅菌無死角。所以，臭氧滅菌也是目前被廣泛使用的（de）滅菌（jun1）方（fāng）式。用臭氧消毒空氣（qì），必須是在封閉空間，且室（shì）內無人條件（jiàn）下進行（háng），消毒後至少過 30min 才能進（jìn）入（rù）。另外臭氧（yǎng）的（de）密度比空氣大（dà），在空氣中會迅速下降到（dào）空間的底層，因此臭氧（yǎng）發生器也應當安裝在（zài）無菌室的頂部。一般（bān）滅菌時間選擇30min即可，要求空間中臭氧濃度不低於20mg/m³ 。

化學熏蒸：化學熏蒸是（shì）一種十分傳統的空間滅菌方式，一（yī）般是采用易揮發氣化的化學物質的蒸汽（qì）對空間微生物進行（háng）殺滅的目的，一般常用甲醛、戊（wù）二醛、過氧化氫、過氧乙酸等。

這裏以常用的甲醛（quán）熏（xūn）蒸為例。一般甲醛熏蒸又稱甲醛高錳酸鉀熏蒸，將40%的甲醛溶（róng）液加入到（dào）高錳酸鉀（jiǎ）溶液中，二者發生反應（yīng），放出大量的熱使（shǐ）甲醛蒸發到空間中，從而對無菌室進行滅菌。一般甲（jiǎ）醛熏蒸的滅菌效果比（bǐ）較理想，對黴菌等較難清除的汙染菌也有較好的殺滅效果，因此（cǐ）在（zài）無菌室被黴菌汙染時，通常都是使用甲醛進行熏蒸來（lái）徹（chè）底消滅汙染源。

但（dàn）是甲醛熏蒸（zhēng）的缺點也（yě）是很明顯的，因為甲醛是（shì）一種強致（zhì）癌性的化學品，對人體的傷害較大，在（zài）使用過程中需要（yào）特別注意（yì），並且殘留量也要進（jìn）行嚴格的控製。每次熏蒸後，至少需要通風24h才可以使用。

目前對熏蒸後甲醛的殘留量並（bìng）沒有明確要求，還是要通過經驗來（lái）判斷，目前國家對居民住房要求（qiú）甲醛（quán）含量不大於0.1mg/m³，所以我（wǒ）們也可使用甲醛含量測定儀（yí）來對熏蒸後的空間進行檢測。目（mù）前甲醛熏蒸滅菌的方法食品檢測無菌室的滅菌中已經較少使用，主要也是因為操作比較繁（fán）瑣，滅菌時間較長，進行一次甲醛熏蒸之後，會有幾天無法使（shǐ）用無菌室進行檢測，所以隻有在其他滅菌方法無法達到理想的滅菌效（xiào）果時，才會（huì）考慮進（jìn）行甲醛熏蒸。

而其實這種滅菌方（fāng）式目前在很多藥企的（de）無菌室（shì）滅菌，還是會經常用到的，另外，有些生產區域如果長期被黴菌汙染，也會考慮用甲醛熏蒸的方法來解決。

了（le）解了這幾種常用的無菌室滅菌方式（shì），在我（wǒ）們日（rì）常的工作中也可以根據自己實驗室情況進行選擇，尤其是（shì）長期使用一種滅（miè）菌方式若是滅菌效果達不到理想的效果（guǒ）時，可以根據實際情況更換滅菌方式，或者（zhě）引進一種新（xīn）的滅菌方式兩者結合，以期達到預想的效果。